Главная страница

03. Методы исследования в микробиологии (презентация). 03. Методы исследования в микробиологии (презентация).ppt. Общая Микробиология. Организация микробиологической лабораторной службы


Скачать 8,24 Mb.
НазваниеОбщая Микробиология. Организация микробиологической лабораторной службы
Анкор03. Методы исследования в микробиологии (презентация).ppt
Дата11.11.2018
Размер8,24 Mb.
Формат файлаppt
Имя файла03. Методы исследования в микробиологии (презентация).ppt.ppt
ТипДокументы
#58144
Каталогid75797089

С этим файлом связано 14 файл(ов). Среди них: Терминальные состояние, сердечно – легочная реанимация.ppt.ppt, Сердечно-легочная реанимация (Реком. Америк. 2015 год).ppt.ppt, стандарты АНЕСТЕЗИОЛОГИЯ-РЕАНИМАЦИЯ.doc, Лихванцев - Практическое руководство по анестезиологии.doc, Zudbinov_Yu_I_Azbuka_EKG_i_Boli_v_serdtse_1.pdf, 03. Методы исследования в микробиологии (презентация).ppt.ppt, Основы санитарной микробиологии -эл. пособие.ppt.ppt, Intensive_therapy_of_pulmonary_embolism.pdf, Prasmytskiy_O_T__Grachev_S_S_-Anesteziologia_i_reanimatologia-Iz и ещё 4 файл(а).
Показать все связанные файлы

Общая Микробиология.

Организация микробиологической лабораторной службы.

Правила работы в микробиологической лаборатории


В микробиологической практике используют, главным образом, чистые культуры микроорганизмов, т. е. популяции микроорганизмов одного вида, часто являющихся потомством одной клетки.
При исследованиях с не идентифицированными микроорганизмами, при их выделении из объектов окружающей среды и техногенных потоков, могут быть выделены патогенные и условно патогенные микроорганизмы.

По внешнему виду различают кокковые (шаровидные), палочковидные и спиралевидно-извитые формы бактерий


Кокковые бактерии в зависимости от расположения отдельных клеток относительно друг друга разделяют на группы:
1)микрококки - имеют одиночное и беспорядочное расположение клеток;
2) диплококки - представляют сцепление двух кокков;
3) стрептококки - располагаются цепочками различной длины ;
4) тетракокки - отдельные кокки, сцепленные по четыре.
5) стафилококки -скопление кокков, напоминающие грозди винограда;
6) сарцины - выглядят в виде пакетов или тюков, по 8-16 кокков в каждом.


1


2


3


4


5


6

Палочковидные


Палочковидные (цилиндрические) формы бактерий могут быть короткие и длинные, толстые и тонкие, прямые и изогнутые, с наостренными, округленными или прямыми концами. Они бывают спорообразующими (бациллы) и неспорообразующими (бактерии). По взаимному расположению клеток относительно друг друга их делят па одиночные, диплобактерии и динлобациллы, стрептобактерии и стрептобациллы.

Палочковидные

Спиралевидно-извитые


Спиралевидно-извитые бактерии по длине, числу и размеру витков разделяют на:
1)вибрионы - короткие слегка изогнутые бактерии, имеющие вид запятой;
2)спириллы - более длинные бактерии с несколькими (5-6 крупными завитками);
3)спирохеты - тонкие длинные бактерии со многими мелкими завитками в виде штопора.


1


3


2

Питательные среды


ПИТАТЕЛЬНЫЙ АГАР используют для выращивания бактерий, содержит гидролиза кильки, экстракт дрожжей, агар, хлорид натрия и дистиллированную воду. Растворяют ингредиенты, кипятят, фильтруют, стерилизуют (120 гр. С 20 минут). Затем разливают в стерильные пробирки или чашки Петри. На чашке с агаром видны разнообразные колонии микробов, выросшие в при посеве воздуха.


КРОВЯНОЙ АГАР питательная среда для выявления гемолитических свойств бактерий. К расплавленному остуженному (до 45-50 гр С) питательному агару асептически добавляют 5-10% дефибринированной крови, хорошо перемешивают и сразу же разливают в чашки Петри. Вокруг выросших колоний отчетливо видны прозрачные зоны гемолиза


ЖЕЛТОЧНО-СОЛЕВОЙ АГАР ЧИСТОВИЧА - селективная среда, предназначенная для культивирования стафилококков. Содержит питательный агар, желток куриного яйца, повышенные концентрации хлорида натрия (8-10%), которые не препятствуют размножению стафилококков и обеспечивают элективность среды для данных микробов. Среда позволяет дифференцировать лецитиназопозитивные стафилококки, вокруг колоний которых образуются зоны помутнения с перламутровым оттенком.


СРЕДА ЭНДО предназначена для выделения энтеробактерий, обнаружения эшерихий. Состоит из питательного агара, 1% лактозы и индикатора – основного фуксина, обесцвеченного сульфитом натрия. Свежеприготовленная среда бесцветна или имеет бледно-розовую окраску. При росте лактозоположительных бактерий их колонии окрашиваются в темно-красный цвет с металлическим блеском; лактозоотрицательные кишечные палочки образуют бесцветные колонии

Фазы роста


Рост периодической культуры бактерий, выращиваемых на жидкой питательной среде, подразделяют на несколько фаз:
1. лаг-фаза — период между посевом бактерий и началом размножения. Продолжительность лаг-фазы в среднем 4—5 ч. Бактерии при этом увеличиваются в размерах и готовятся к делению; нарастает количество нуклеиновых кислот, белка и других компонентов.
2. фаза логарифмического роста является периодом интенсивного деления бактерий. Продолжительность ее около 5— 6 ч. При оптимальных условиях роста бактерии могут делиться каждые 20—40 мин.
3. фаза стационарного роста, или максимальной концентрации бактерий;( количество жизнеспособных клеток остается без изменений, составляя максимальный уровень (М-концентрация)).
4. фаза гибели бактерий (характеризуюется отмиранием бактерий в условиях истощения источников питательной среды и накопления в ней продуктов метаболизма бактерий)

Размножение бактерий в жидкой питательной среде


Бактерии, засеянные в определенный, не изменяющийся объем питательной среды, размножаясь, потребляют питательные элементы, что приводит в дальнейшем к истощению питательной среды и прекращению роста бактерий. Культивирование бактерий в такой системе называют периодическим культивированием, а культуру — периодической. Если же условия культивирования поддерживаются путем непрерывной подачи свежей питательной среды и оттока такого же объема культуральной жидкости, то такое культивирование называется непрерывным, а культура — непрерывной.
При выращивании бактерий на жидкой питательной среде наблюдается придонный, диффузный или поверхностный (в виде пленки) рост культуры.

Стерилизация.


Стерилиза́ция — полное освобождение какого-либо предмета от всех видов микроорганизмов, включая бактерии и их споры, грибы,вирионы, а также от прионного белка, находящихся на поверхностях, оборудовании, в пищевых продуктах и лекарствах.
Тепловая стерилизация основана на чувствительности микробов к высокой температуре. При +60оС и наличии воды происходит денатурация белков, в том числе ферментов, вследствие чего вегетативные формы микробов погибают.
Стерилизация сухим жаром происходит в сухожаровых шкафах, или печах Пастера. Обеззараживание материала в нем происходит при 160-170°C в течение 60-120 мин. Недостаток: высокую температуру выдерживают только некоторые стерилизуемые предметы(лабораторное стекло)

Паровая стерилизация


Осуществляется подачей насыщенного водяного пара под давлением в паровых стерилизаторах (автоклавах).


Стерилизуют перевязочный материал, белье, инструменты, питательные среды, растворы, инфекционный материал.

Режимы паровой стерилизации


132 °C — 2 атмосферы(2 кгс/см2) — 20 минут — основной режим. Стерилизуют все изделия (стекло, металл, текстиль, КРОМЕ РЕЗИНОВЫХ).
120 °C — 1,1 атмосфера(1,1 кгс/см2) — 45 минут — щадящий режим (стекло, металл, резиновые изделия, полимерные изделия — согласно паспорту, текстиль)
110 °C — 0,5 атмосферы(0,5 кгс/см2) — 180 мин — особо щадящий режим (нестойкие препараты, питательные среды)

Дезинфекция


Дезинфекция - это обеззараживание объектов окружающей среды с помощью химических веществ, обладающих антимикробным действием.
Цель дезинфекции – предупредить передачу возбудителей от инфицированного организма неинфицированному.
Химическую дезинфекцию проводят с помощью различных дезинфицирующих веществ.

В микробиологический лаборатории используют:


1. хлорную известь (0,1 – 10% раствор);
2. хлорамин (0.5 -5% раствор), для дезинфекции рук 0,25 – 0,5% раствор, для дезинфекции предметов ухода за больными при кишечных и воздушно-капельных инфекциях 1-3% раствор, при туберкулезе – 5% раствор;
3. фенол (карболовая кислота) в виде 3 – 5% раствора для дезинфекции помещений;
лизол (3 – 5% раствор);
5. биглюконат хлоргексидина (гибитан), для дезинфекции рук 0,5% раствор, для дезинфекции помещений 0,1% раствор;
6. дихлорид ртути (сулема) – иногда используют для дезинфекции предмете ухода за больными. Препарат высокотоксичен, всасывается через кожу.


Тепловая дезинфекция включает воздействие горячей водой и насыщенным паром: при 80°C – 10 мин; при 85°C – 3 мин; при 90°C – 1 мин. При этом режиме погибают все вегетативные формы бактерий и большинство вирусов.
Ультрафиолетовое облучение происходят с помощью специальных бактерицидных ламп (настенных, потолочных, передвижных) для обеззараживания воздуха, различных поверхностей.

Утилизация отходов.


отходы подразделяются на классы в зависимости от степени их опасности:
Класс А – Неопасные отходы;
Класс Б – Опасные отходы;
Класс В – Чрезвычайно опасные отходы;
Класс Г – Близкие по составу к промышленным;

Вирусология


Вирусология — раздел микробиологии, изучающий вирусы (от латинского слова virus — яд).


Вирусы обладают уникальными свойствами, которые позволяют выделить их из общей массы микроорганизмов:
Наличие только одного из двух видов нуклеиновых кислот.
Отсутствие собственной белок-синтезируемых систем.
Они представляют собой генетических паразитов.
Вирусы не растут, а только репродуцируются (размножаются).


Впервые существование вируса (как нового типа возбудителя болезней) доказал в 1892 году русский учёный Д. И. Ивановский.

Лабораторная диагностика вирусных инфекций


Для лабораторной диагностики вирусных инфекций используются различные методы.
Вирусологическое исследование (световая микроскопия) позволяет обнаружить характерные вирусные включения, а электронная микроскопия - сами вирионы, и по особенностям их строения диагностировать соответствующую инфекцию (например, ротавирусную). Вирусологическое исследование направлено на выделение вируса и его идентификацию. Для выделения вирусов используют заражение лабораторных животных, куриных эмбрионов или культуры тканей.

Первичную идентификацию выделенного вируса до уровня семейства можно провести с помощью:


- определения типа нуклеиновой кислоты (проба с бромдезоксиуридоном), - особенностей ее строения (электронная микроскопия), - размером вириона (фильтрование через мембранные фильтры с порами диаметром 50 и 100 нм), - наличия суперкапсидной оболочки (проба с эфиром), - гемагглютининов (реакция гемагглютинации), - типа симметрии нуклеокапсида (электронная микроскопия).

Вирусологическое исследование


Вирусологическое исследование - это "золотой стандарт" вирусологии и должно проводится в специализированной вирусологической лаборатории. В настоящее время оно используется практически только в условиях возникновения эпидемической вспышки того или иного вирусного инфекционного заболевания. Для диагностики вирусных инфекций широкое применение нашли методы иммунодиагностики (серодиагностики и иммуноиндикации). Они реализуются в самых разнообразных реакциях иммунитета:
радиоизотопный иммунный анализ (РИА), иммуноферментный анализ (ИФА), реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакция связывания комплемента (РСК), реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и другие.


перейти в каталог файлов
связь с админом