Главная страница
qrcode

Практическое занятие-Нуклеиновые кислоты. Структура и обмен нуклеиновых кислот


Скачать 21.55 Kb.
НазваниеСтруктура и обмен нуклеиновых кислот
Дата01.09.2020
Размер21.55 Kb.
Формат файлаdocx
Имя файлаПрактическое занятие-Нуклеиновые кислоты.docx
ТипДокументы
#89970
Каталог

1. Тема занятия: СТРУКТУРА И ОБМЕН НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ

2. Цели занятия: изучить структуру, переваривание и обмен нуклеиновых кислот.

3. Задачи занятия: рассмотреть механизмы распада нуклеиновых кислот в тканях, особенности их синтеза, освоить колориметрический метод определения концентрации мочевой кислоты в сыворотке крови и моче, рассмотреть клинико-диагностическое значение этих показателей.

4. Основные понятия, которые должны быть усвоены студентами в процессе изучения темы

Уровни структурной организации нуклеиновых кислот. Строение и свойства различных РНК. Структура и свойства ДНК. Денатурация и ренатурация ДНК. Гибридизация ДНК-ДНК и ДНК-РНК.

Нуклеазы, нуклеотидазы, нуклеозидазы желудочно-кишечного тракта и тканей. Катаболизм пуриновых нуклеотидов. Конечные продукты распада.

Гиперурикемия. Гиперурикурия. Подагра. Мочекаменная болезнь. Аллопуринол в лечении подагры. Синтез пуриновых нуклеотидов. Происхождение атомов пуринового ядра. Инозиновая кислота – предшественник адениловой и гуаниловой кислот. Синтез пуриновых нуклеотидов из готовых форм. Синдром Леш-Нихана. Распад пиримидиновых нуклеотидов, конечные продукты распада. Синтез пиримидиновых нуклеотидов. Синтез деоксирибонуклеотидов.

5. Вопросы к занятию

1. Нуклеиновые кислоты как полимерные соединения. Состав и строение нуклеотидов, их функции в организме. Биологическое значение нуклеиновых кислот. Уровни структурной организации. Видовая специфичность первичной структуры.

2. Химическая структура нуклеотидов. Функции нуклеотидов и их производных в организме.

2. Химический состав РНК, структура, свойства различных РНК

3. ДНК: химический состав, структура, свойства. Денатурация и ренатурация. Гибридизация ДНК-ДНК и ДНК-РНК

4. Распад нуклеиновых кислот в желудочно-кишечном тракте

5. Расщепление пиримидиновых нуклеотидов в тканях. Конечные продукты обмена

6. Расщепление пуриновых нуклеотидов в тканях. Конечные продукты обмена. Подагра. Мочекаменная болезнь.

6. Вопросы для самоконтроля

А) Тесты входного контроля (ВК)

1. К пуриновым азотистым основаниям относятся:

А) аденин. Б) урацил. В) гуанин. Г) тимин

2. К пиримидиновым азотистым основаниям относятся:

А) аденин. Б) урацил. В) гуанин. Г) тимин

3. В состав нуклеотида входят:

А) азотистые основания. Б) углевод. В) аминокислоты. Г) фосфорная кислота

4. Нуклеиновые кислоты являются:

А) полипептидами. Б) полисахаридами. В) полинуклеотидами

5. ДНК и РНК отличаются:

А) структурой углевода. Б) структурой фосфорной кислоты. В) набором азотистых оснований

Б) Тесты текущего контроля (ТК)

1. Фрагменту цепи ДНК: ЦАА – ГАТ – ААТ комплементарна последовательность нуклеотидов:

А) ГТТ – ЦТА - ТТЦ. Б) АГА – ГАТ – ЦАА В) ТАЦ – ЦТА – АГА

2.. Фрагменту цепи ДНК: ТАЦ – ЦТА – АГА комплементарна последовательность нуклеотидов:

А) АТЦ - ГАТ – ТЦТ. Б) АГА – ГАТ – ЦАА В) ТАЦ – ЦТА – АГА

3. Аминогруппу в 6 положении имеют пуриновые основания:

А) аденин. Б) гуанин. В) гипоксантин

4. Кето группу в 4 положении имеют пиримидиновые основания:

А) урацил. Б) тимин. В) цитозин

5. В молекуле ДНК тимину комплементарно:

А) гуанин. Б) цитозин. В) тимин. Г) аденин

6. В молекуле ДНК гуанину комплементарно:

А) гуанин. Б) цитозин. В) тимин

7. Между гуанином и цитозином в молекуле ДНК возникает водородных связей:

А) одна. Б) две. В) три

8. Между аденином и тимином в молекуле ДНК возникает водородных связей:

А) одна. Б) две. В) три

9. В состав мононуклеотидов входят:

А) пуриновые основания. Б) пиримидиновые основания. В) глюкоза. Г) рибоза.

Д) серная кислота. Е) фосфорная кислота

10. Нуклеотиды соединяются в полинуклеотидную цепь связью:

А) пептидная. Б) фосфодиэфирная. В) дисульфидная. Г) водородная

11. Правила Чаргаффа отражают положения:

А) А=Т, Г=Ц. Б) А+Г=Ц+Т. В) А=Ц, Г=Т. Г ) А+Т=Г+Ц

12. При распаде цитозина образуются:

А) NH3, CO2, H2O. Б) NH3, CO2, -аминоизомасляная кислота. В) мочевая кислота. Г) NH3, CO2, -аланин

13. При распаде тимина образуются:

А) NН3, СО2, -аланин. Б) NН3, СО2, Н2О. В) NН3, СО2, -аминоизомасляная кислота. Г) мочевая кислота

14. Концентрация мочевой кислоты в крови составляет:

А) 0,01-0,1 ммоль/л. Б) 0,1-0,5 ммоль/л. В) 0,5-1,0 ммоль/л. Г) 1,0-2,0 ммоль/л.

Д 5) 2,0-3,5 ммоль/л

Ситуационные задачи

1. В результате мутации код УЦГ изменился на УЦА. Пострадает ли синтез белка? Почему?

2. При голодании нарушается обмен нуклеиновых кислот, в частности снижается синтез нуклеотидов. Объясните молекулярные механизмы нарушений.

3. Для лечения рака крови применяют антагонисты фолиевой кислоты. Напишите стадии синтеза нуклеотидов, в которых участвует этот витамин. Объясните механизм противоопухолевого действия антифолатов.

4. У пациента обнаружен генетический дефект фермента гипоксантингуанин-фосфориболилтрансфераза. К каким последствиям может привести недостаточность этого фермента?

5.Больной жалуется на боли в суставах пальцев. Содержание мочевой кислоты в крови составляет 450 мкМ/л, количество сиаловых кислот 2,1 мМ/л. Какое заболевание наиболее вероятно? Какую диету вы назначите?

Основная и дополнительная литература

а) Основная литература:

1. «Биохимия». Краткий курс с упражнениями и задачами /Текст/. Под ред. Е.С. Северина, А.Я. Николаева.— М. : ГЭОТАР-МЕД, 2001 .— 448с. : ил. — (ХХI век).

2. «Особенности обмена веществ у новорожденных и грудных детей». /Текст/: учебное пособие, рекомендовано УМО. Макаренко Т.Г., Стунжас Н.М. Смоленск. -2010 - 63 с. // http://smolgmu.ru/index.php?page[common]=download&path=0&filename=67d791104b9b66496202c3bd512be8b0&cleanname=92%20-%20%D0%94%D0%B5%D1%82%D1%81%D0%BA%D0%B8%D0%B5%20%D0%BE%D1%81%D0%BE%D0%B1%D0%B5%D0%BD%D0%BD%D0%BE%D1%81%D1%82%D0%B8&ext=pdf

3. Северин Е.С., Биохимия [Электронный ресурс]: учебник / под ред. Е. С. Северина. - 5-е изд., испр. и доп. - М: ГЭОТАР-Медиа, 2015. - 768 с. //http://www.studmedlib.ru/book/ISBN9785970433126.html
б) Дополнительная литература:

1. Биологическое окисление. Общие пути катаболизма. Биоэнергетика /Текст/ учебное пособие. Д.П. Бондарев, Н.М. Стунжас. Смоленск. СГМА. 2007. – 51 с. // http://smolgmu.ru/index.php?page[common]=download&path=0&filename=0a01044e2a80fa617e5a6c33f4fe11b5&cleanname=87%20-%20%D0%91%D0%B8%D0%BE%D0%BE%D0%BA%D0%B8%D1%81%D0%BB%D0%B5%D0%BD%D0%B8%D0%B5%20-%20%D0%BC%D0%B5%D1%82%D0%BE%D0%B4%D0%B8%D1%87%D0%BA%D0%B0%20%D0%B4%D0%BB%D1%8F%20%D1%84%D0%B0%D1%80%D0%BC%D0%B0%D1%86%D0%B5%D0%B2%D1%82%D0%BE%D0%B2&ext=pdf

2. Краткий курс лекций по биологической химии для студентов, обучающихся по специальности Педиатрия/Текст/ учебное пособие/ Т.Г. Макаренко под ред. Н.М. Стунжаса- Смоленск. СГМА. 2014- 73 с. http://smolgmu.ru/index.php?page[common]=download&path=0&filename=9f06c473141e36dc234bb938860ad00a&cleanname=94%20-%20%D0%9A%D1%80%D0%B0%D1%82%D0%BA%D0%B8%D0%B9%20%D0%BA%D1%83%D1%80%D1%81%20%D0%BB%D0%B5%D0%BA%D1%86%D0%B8%D0%B9%20%D0%BF%D0%BE%20%D0%B1%D0%B8%D0%BE%D0%BB%D0%BE%D0%B3%D0%B8%D1%87%D0%B5%D1%81%D0%BA%D0%BE%D0%B9%20%D1%85%D0%B8%D0%BC%D0%B8%D0%B8%20%D0%B4%D0%BB%D1%8F%20%D0%BF%D0%B5%D0%B4&ext=pdf

Содержание практической части занятия (лабораторный практикум):

1. Определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови

Содержание мочевой кислоты в сыворотке крови находится в переделах 0,12-0,24 мМоль/л. Гиперурикемия – повышение содержания мочевой кислоты в крови является симптомом начальных стадий поражения почек (острый, хронический нефрит) и подагры. Она может наблюдаться при усиленном распаде нуклеопротеидов ( гемоглобинопатии, эритремия, лейкемии и др.) У детей её уровень в крови выше, чем у взрослых.

Ход работы: в центрифужную пробирку венсти 1,5 мл сыворотки крови, 1,5 мл 19\0% ТХУ и 1,5 мл дистиллированной воды. Содержимое пробирки перемешать. Через 10 минут пробу отцентрифугировать в течение 10 минут. Затем в опытную мерную пробирку внести 1,5 мл центрифугата, 0,7 мл насыщенного раствора соды, 1 каплю реактива Фолина и объём жидкости довести до 10 мл дистиллированной водой. Раствор окрашивается в синий цвет. В контрольную пробирку вместо центрифугата внести 1,5 мл дистиллированной воды. Обе пробы колориметрировать с красным светофильтром в кюветах 10 мм. По калибровочному графику найти содержание мочевой кислоты в мкг и сделать перерасчет в мМоль/л по формуле: Х=а х 3 х100 х 0,0)59/1000 х 1,5, где:

Х – концентрация мочевой кислоты в мМоль/л

А – количество мочевой кислоты по графику в мкг

3 –разведение

100 – коэффициент пересчёта

1000 - коэффициент пересчёта в мг

1,5 – объём сыворотки в пробе

0,059 - коэффициент пересчёта в мМоль/л

Экстинция на ФЭК равна 0.06. Найти по графику (смотреть отдельный файл) концентрацию мочевой кислоты в мкг. Подставить результат в формулу и рассчитать концентрацию мочевой кислоты в сыворотке крови. Сравнить с нормой, сделать вывод.

2. Определение суточной экскреции мочевой кислоты с мочой

За сутки выделяется 0,5-1,5 г мочевой кислоты.

Моча для работы предварительно разводится в цилиндре в 50 раз.

Работа выполняется аналогично первой, но вместо сыворотки крови используется такой же объём разведенной мочи.

По графику найти содержание мочевой кислоты в пробе, сделать перерасчёт для оценки суточной экскреции по формуле: Х= а х б х в / 1,5 х 1000, где:

Х – концентрация мочевой кислоты в мг за сутки

а – количество мочевой кислоты по графику в мкг

б –разведение

Д – диурез (1500 мл)

100 – коэффициент пересчёта

1000 - коэффициент пересчёта в мг

1,5 – объём мочи в пробе

Экстинция на ФЭК равна 0.18. Найти по графику (смотреть отдельный файл) концентрацию мочевой кислоты в мкг. Подставить результат в формулу и рассчитать концентрацию мочевой кислоты в сыворотке крови. Сравнить с нормой, сделать вывод.
перейти в каталог файлов


связь с админом